Revisi per 23 April 2012 07.19 sunting Sentausa (bicara \| kontrib) Peninjau otomatis 8.455 suntingan k koreksi ← Revisi sebelumnya		Revisi per 28 Mei 2012 01.15 sunting balikkan Xqbot (bicara \| kontrib) Bot 189.792 suntingan k r2.7.3) (bot Menambah: ro:Secvențializarea ADN; kosmetik perubahan Revisi selanjutnya →
Baris 71: == Sejarah == Pada mulanya, sekuensing DNA dilakukan dengan men[[Transkripsi (genetik)\|~~transkripsi~~transkripsikannya]]~~kannya~~ ke dalam bentuk [[RNA]] terlebih dahulu karena metode sekuensing RNA telah ditemukan sebelumnya. Pada tahun 1965, [[Robert William Holley\|Robert Holley]] dan timnya dari [[Universitas Cornell\|Cornell University]] di [[New York]], [[Amerika Serikat]], mempublikasikan sekuens [[tRNA]] [[alanin]] dari [[khamir]] yang terdiri atas 77 [[nukleotida]].<ref>{{cite journal\|doi=10.1126/science.147.3664.1462\|journal=Science\|title=Structure Of A Ribonucleic Acid\|author=Holley, R.W.; Apgar, J.; Everett, G.A.; Madison, J.T.; Marquisee, M.; Merrill, S.H.; Penswick, J.R.; Zamir, A.\|date=19 Maret 1965\|volume=147\|pages=1462–1465\|issue=3664}}</ref> Sekuensing tRNA tersebut membutuhkan waktu 7 tahun dan hasilnya merupakan sekuens molekul [[asam nukleat]] yang pertama kali dipublikasikan.<ref>{{en}} {{cite book \|author=Goujon, P. \|title=From Biotechnology to Genomes: The Meaning of the Double Helix Baris 146: Untuk memperoleh hasil reaksi berlabel yang dapat dideteksi dari DNA cetakan, metode "sekuensing daur" (''cycle sequencing'') paling lazim dilakukan. Dalam metode ini dilakukan berturut-turut penempelan ''primer'' (''primer annealing''), ekstensi oleh polimerase DNA, dan denaturasi (peleburan atau ''melting'') untai-untai DNA cetakan secara berulang-ulang (25–40 putaran). Kelebihan utama sekuensing daur adalah lebih efisiennya penggunaan pereaksi sekuensing yang mahal ([[BigDye]]) dan mampunya mengurutkan templat dengan struktur sekunder tertentu seperti ''hairpin loop'' atau daerah kaya-GC. Setiap tahap pada sekuensing daur ditempuh dengan mengubah temperatur reaksi menggunakan mesin pendaur panas (''thermal cycler'') [[PCR]]. Cara tersebut didasarkan pada fakta bahwa dua untai DNA yang komplementer akan saling menempel (berhibridisasi) pada temperatur rendah dan berpisah (terdenaturasi) pada temperatur tinggi. Hal penting lain yang memungkinkan cara tersebut adalah penggunaan enzim DNA polimerase dari organisme termofilik (organisme yang hidup di lingkungan bertemperatur tinggi), yang tidak mudah terurai pada temperatur tinggi yang digunakan pada cara tersebut (>95 °C). === Sekuensing generasi berikutnya === ==== Pyrosequencing ==== Pyrosequencing adalah teknik pemetaan [[DNA]] yang berdasarkan deteksi terhadap [[pirofosfat]] (PPi) yang dilepaskan selama [[sintesis]] DNA.<ref name=poirel/> Teknik ini memanfaatkan [[reaksi]] [[enzimatik]] yang dikatalisis oleh [[ATP sulfurilase]] dan [[luciferase]] untuk pirofosfat inorganik yang dilepaskan selama penambahan [[nukleotida]].<ref name=poirel>{{en}} Poirel L, Naas T, Nordmann P. 2006. Pyrosequencing as a Rapid Tool for Identification of GES-Type Extended-Spectrum Lactamases. ''J Clin Microbiol'' 44(8):3008-11.</ref> Baris 190: [[pl:Sekwencjonowanie DNA]] [[pt:Sequenciamento de DNA]] [[ro:Secvențializarea ADN]] [[sv:Dna-sekvensering]] [[tr:DNA dizileme]]

Pengurutan DNA: Perbedaan antara revisi